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辅助噬菌体/ssDNA

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一、背景介绍


辅助噬菌体是一种自身 DNA 复制效率极低的丝状噬菌体突变型。其基因组具有M13噬菌体的所有功能基因,但IG区是缺陷的,不能被pⅡ蛋白识别,因而辅助噬菌体本身DNA不能进行单链复制。辅助噬菌体能为噬菌粒提供pⅡ蛋白和包装蛋白,在辅助噬菌体的帮助下,噬菌粒可以顺利的进行DNA的复制与噬菌体的包装,完成对宿主的侵染(这一过程常称为超染)。常用的辅助噬菌体有VCSM13和M13K07 。


二、工作原理


当含有重组基因的噬菌粒转染至大肠杆菌后,再用辅助噬菌体进行超染,辅助噬菌体合成的 pⅡ蛋白就会优先识别噬菌粒上的正常基因间隔区(IG region),启动滚环复制,产生ssDNA,这样所产生的子代噬菌体外壳蛋白所包装的 ssDNA 主要是来自含有重组基因组的噬菌粒的 DNA,并同时展示噬菌粒编码的 pⅢ或 pⅧ与外源肽段的融合蛋白和辅助噬菌体编码的野生型 pⅢ或 pⅧ蛋白,确保重组噬菌体能正常感染组装和增值。


产品信息


M13KO7 辅助噬菌体是 gII基因具有Met40IIe突变的M13噬菌体,具有来自于 P15A 的复制起点以及来自于 Tn903 的卡那霉素抗性基因,这两个片段插入M13的复制起点。M13KO7 能够在缺少噬菌粒 DNA 的情况下进行复制,当存在一个携带有野生型 M13 或 f1 复制起点的噬菌粒时,单链噬菌粒会被优先包装并被分泌到培养基中,因此其常用于噬菌体展示抗体库构建。


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 五、产品说明


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